PCR儀由熒光定量系統(tǒng)和計算機組成，用來監(jiān)測循環(huán)過程的熒光。與實時設(shè)備相連的計算機收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過開發(fā)的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強度相對于循環(huán)數(shù)的圖表。原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析。熒光定量PCR儀的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進行正常化處理來彌補背景熒光的差異。正常化后可以設(shè)定域值水平，這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平。
PCR擴增原理是在PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記，使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結(jié)果輸出。
PCR儀的相關(guān)維修經(jīng)驗如下：
1.熱蓋問題
當發(fā)現(xiàn)上面的旋轉(zhuǎn)輪可以轉(zhuǎn)動但是蓋子不往下動，這時候只聽到“咔咔”的聲音。這個時候你看下頂蓋旋轉(zhuǎn)輪頂蓋在2個小的螺釘之間有一個黃顏色的類似螺釘樣的小按鈕，你用圓珠筆等筆尖用力按住這個鈕，反時針轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)輪，這時候你就會發(fā)現(xiàn)問題解決了。
2.儀器使用久了溫度降到一定時不降了而到不了所設(shè)定的溫度值。這時把PCR側(cè)翻，在儀器的底部通風網(wǎng)格部分，是否有大量的灰塵，用小毛刷清潔下，問題就可以解決了。
3.用了幾年發(fā)現(xiàn)樣品出來的結(jié)果很不好，這時就需要你觀察下block的溫度了，看是否有很大的漂移了，如是則block需要校準溫度了。
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